绿色木霉3.3744产纤维素酶固态发酵条件研究

发布于:2021-04-20 00:05:16

第28卷第1期 2007年2月 河南工业大学学报(自然科学版) Journal of Henan University of Technology(Natural Science Edition) V01.28.NO.1 Feb.2007 文章编号:1673—2383(2007)01-0046—03 绿色木霉3.3744产纤维素酶固态发酵条件研究 张 磊1’2,吴兴泉1,陈士华1 (1.河南工业大学生物工程学院,河南郑州450052;2.河南科技学院,河南新乡453003) 摘要:采用固态发酵研究了绿色木霉3.3744菌株产纤维素酶的最佳培养条件.结果表明:最 佳碳源为小麦秸粉:麦麸(4:6),料:水=1:2.5,加入1%(NH。):SO。,0.1%Tween80,初始pH 值为5.0(滤纸酶活)或为3.O(CMC酶活),28℃下培养96 h时其产纤维素酶活力最高. 关键词:绿色木霉;纤维素酶;发酵条件 中图分类号:TQ925 文献标识码:A 方为:在300 mL的三角瓶中加入硫酸铵0.125 0 g 前言 纤维素酶是重要的复合酶产品,在饲料、酒 (1%),3/2混合的麦麸/d,麦秸杆5 g,2.5倍(W/ y)的水(12.5 mL),灭菌后备用. 1.2.1 最佳氮源的筛选 精、纺织和食品等领域已广泛应用.在我国,纤维 素酶是继糖化酶、淀粉酶和蛋白酶之后的第4大 工业酶种,甚至完全有可能成为第1大酶种,因此 纤维素酶是酶制剂工业中的一个新的增长点. 绿色木霉是一种纤维素酶高产菌,近年来对 其产纤维素酶特性研究很多,但结果却不尽相同. 通过比较发现,不同绿色木霉菌株的产纤维素酶 培养条件的相差很大,培养温度由25~32℃,培 养初始pH值从4.0~8.0不等,培养基含水量从 120%~400%不等.而碳源和氮源的区别由于所 用的降解材料不尽相同,其相互配比也有差 别¨{1.笔者对绿色木霉3.3744产纤维素酶的最 佳培养条件进行了研究,为利用该菌株进行纤维 素的降解提供了理论依据. 1 选用9种氮源进行试验,分别为硫酸铵、过硫 酸铵、磷酸氢二铵、氯化铵、硝酸钾、硝酸镁、硝酸 铵以及有机氮源尿素和蛋白胨.试验以上述氮源 分别替代原培养基中的硫酸铵配制基础固体发酵 培养基,添加量均为1%.将含不同氮源的培养基 装入三角瓶中,然后分别加入1.0 mL孢子悬浮 液,28℃下培养96 h,测定滤纸酶活力和CMC酶 活力.每个处理设3次重复. 1.2.2 最佳碳源的筛选 选用的碳源包括农作物废弃物小麦秸秆、玉 米秸秆、玉米芯、麦麸.以上述碳源(5 g碳源)替 代3/2混合的麦麸/小麦秸杆配制基础固体发酵 培养基,培养及酶活测定方法同上.另外,将小麦 秸秆和麦麸两种碳源按不同配比混合(碳源总量 不变,混合配比分别为0:5,1:4,2:3,3:2,4:1, 材料与方法 5:0)进行试验以期明确最佳比例. 1.2.3 表面活性剂对绿色木霉纤维素酶活力的 影响 1.1供试菌种 绿色木霉3.3744:购自中科院微生物研究所. 1.2绿色木霉产纤维素酶的固体培养条件的优化 本研究采用基础固体发酵培养基进行,其配 收稿日期:2006-08—17 基金项目:河南省优秀青年骨干教师项目(155);河南工业大学博 士启动基金项目 作者简介:张磊(1978一),男,河南新乡人,硕士,研究方向为生物 化学与分子生物学. Tween80的浓度设0%、0.06%、0.08%、 0.10%、0.12%和0.14%等6个处理;洗衣粉的 浓度设0%、0.1%、0.3%、0.5%、0.7%和0.9% 等6个处理,分别加入固体发酵基础培养基进行 试验,每处理重复3次. 1.2.4 培养时间对绿色木霉纤维素酶活力的 影响 培养时间设3 d、4 d、5 d、6 d和7 d等5个处 万方数据

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